Transcription de la vidéo
Dans le processus de formation d’ADN recombinant, pourquoi est-il important que la section souhaitée d’ADN et le plasmide bactérien soient coupés avec la même enzyme de restriction? (A) pour réduire la probabilité que la bactérie rejette l’ADN. (B) pour s’assurer que l’ADN et le plasmide ont la même taille. (C) pour créer des extrémités franches non complémentaires. (D) pour créer des extrémités cohésives complémentaires. (E) pour économiser de l’argent.
L’ADN recombinant est la combinaison d’ADN provenant des génomes d’au moins deux types d’organismes différents. Les sections d’ADN sont rassemblées par des techniques de laboratoire. Cela crée une nouvelle séquence génétique qui ne se trouve pas naturellement dans un génome. Généralement, dans le processus de formation d’ADN recombinant, une séquence d’ADN souhaitée est extraite du génome d’un organisme.
Imaginons que la protéine fluorescente produite par cette méduse soit notre gène d’intérêt. Pour extraire ce gène, nous pouvons utiliser une enzyme de restriction qui clive l’ADN aux sites de reconnaissance spécifiques. Lorsqu'elles coupent l'ADN au niveau de leurs sites de reconnaissance, certaines enzymes de restriction peuvent laisser un morceau du simple brin en porte-à-faux à chaque extrémité du gène d’intérêt. Ces extrémités sont appelées extrémités cohésives ou collantes.
En utilisant la même enzyme pour couper le plasmide bactérien à l’endroit où le gène d’intérêt doit être inséré, les extrémités cohésives créées seront complémentaires aux extrémités du plasmide. En raison de la complémentarité de ces extrémités cohésives, les deux fragments d’ADN peuvent se coller l’un à l’autre. Après ligature par l’ADN ligase, on obtient un ADN recombinant.
Dans notre exemple, le gène d’une méduse est inséré dans le plasmide d’une bactérie. Si le gène d’intérêt dans le plasmide avait été coupé avec une enzyme de restriction différente, les extrémités collantes n’auraient pas été complémentaires. Cela empêcherait la formation d’un ADN recombinant.
Nous pouvons maintenant sélectionner (D) comme étant la bonne réponse. Il est important que la section souhaitée d’ADN et le plasmide bactérien soient coupés avec la même enzyme de restriction pour créer des extrémités cohésives complémentaires.