Transcription de la vidéo
Le mécanisme de HpaI est illustré dans la figure fournie. Quel est le terme donné aux coupes formées par HpaI?
Cette question nous interroge sur les enzymes de restriction. Passons en revue ce qu’est une enzyme de restriction et comment elle peut être utilisée dans la manipulation de l’ADN. Les enzymes de restriction sont des outils utiles en biotechnologie car elles peuvent être utilisées dans le clivage de séquences d’ADN spécifiques afin qu’elles puissent être combinées de manière intéressante. Elles ont été initialement découvertes dans les bactéries comme un moyen pour celles-ci de se défendre contre une infection virale. Pour ce faire, elles coupent l’ADN viral en morceaux, ce qui empêche le virus de mener à bien son cycle de vie. Il existe de nombreuses enzymes de restriction différentes, et chacune a sa propre séquence d’ADN cible qu’elle reconnaît et coupe. Il s’agit d’un site de reconnaissance ou de restriction.
Les enzymes de restriction peuvent cliver leur séquence de reconnaissance de différentes manières. Voyons cela plus en détail. L’une des façons produit des extrémités cohésives ou collantes. L’enzyme de restriction EcoRI reconnaît la séquence GAATTC et coupe cette séquence comme indiqué par la ligne noire en pointillés. Lorsque cette séquence est coupée, deux surplombs de nucléotides non appariés se forment. Celles-ci ont une affinité entre elles car elles peuvent former des paires de bases complémentaires les unes avec les autres. C’est pour cela que ces surplombs sont appelés des extrémités cohésives.
Si deux sources différentes d’ADN sont coupées avec la même enzyme de restriction, alors les fragments auront des extrémités collantes compatibles qui peuvent être combinées pour créer de nouvelles informations génétiques. L’autre type de coupe qui peut être effectué par des enzymes de restriction est appelé une coupe franche. C’est ce que nous voyons à gauche dans le schéma fourni. Après avoir clivé avec HpaI, nous obtenons deux fragments aux extrémités franches. Aucune extrémité cohésive n’est produite ici. Par conséquent, le type de coupe que laisse l’enzyme de restriction HpaI est la coupe franche.