نسخة الفيديو النصية
خلال عملية تكوين الحمض النووي (DNA) المعاد الاتحاد، لماذا يجب قطع كل من الجزء المرغوب فيه من الحمض النووي (DNA) وبلازميد البكتيريا باستخدام نفس إنزيم القطع؟ أ: لتقليل احتمالية رفض الخلية البكتيرية للحمض النووي (DNA). ب: للتأكد من أن الحمض النووي (DNA) والبلازميد لهما الحجم نفسه. ج: لتكوين نهايات حادة غير متكاملة. د: لتكوين نهايات لاصقة متكاملة. هـ: لتوفير المال.
الحمض النووي (DNA) المعاد الاتحاد هو اتحاد DNA المعزول من جينومات مصدرين مختلفين على الأقل. تدمج جزيئات DNA معًا عن طريق تقنيات معملية. وينتج عن ذلك تتابع جيني جديد لا يمكن أن يكون له وجود طبيعي في الجينوم. عادة، أثناء عملية تكوين DNA المعاد الاتحاد، يقطع تتابع DNA المرغوب من جينوم كائن حي.
دعونا نتخيل أن البروتين الفلوري الذي ينتجه قنديل البحر هذا هو الجين موضع الاهتمام. لقطع هذا الجين، يمكننا استخدام أحد إنزيمات القطع، وهو إنزيم يقطع DNA عند مواقع تعرف محددة. عند قطع DNA عند مواقع التعرف الخاصة به، فإنه يمكن أن تترك بعض إنزيمات القطع امتدادًا مفرد الشريط على كل من طرفي الجين موضع الاهتمام. وتسمى هذه الأطراف «النهايات اللاصقة».
وباستخدام الإنزيم نفسه لقطع بلازميد البكتيريا الذي يجب إدخال الجين موضع الاهتمام فيه، ستتكون نهايتان لاصقتان متكاملتان عند طرفي البلازميد. وبسبب تكامل هذه النهايات اللاصقة يمكن أن يلتصق مقطعا DNA معًا. بعد الارتباط باستخدام إنزيم الربط، فإننا نحصل على DNA معاد الاتحاد.
وفي هذا المثال يدخل جين قنديل البحر في بلازميد البكتيريا. إذا قطع الجين موضع الاهتمام في البلازميد باستخدام إنزيم قطع مختلف، فإن النهايات لن تكون متكاملة. وقد يمنع ذلك تكوين DNA معاد الاتحاد.
يمكننا الآن تحديد الخيار د باعتباره الإجابة الصحيحة. يجب قطع كل من الجزء المرغوب فيه من الحمض النووي (DNA) وبلازميد البكتيريا باستخدام نفس إنزيم القطع؛ لتكوين نهايات لاصقة متكاملة.